在SAM输出的结果中每一行都包括十二项通过Tab分隔,从左到右分别是:
1 序列的名字(Read的名字)
2 概括出一个合适的标记,各个数字分别代表
1 序列是一对序列中的一个
2 比对结果是一个pair-end比对的末端
4 没有找到位点
8 这个序列是pair中的一个但是没有找到位点
16 在这个比对上的位点,序列与参考序列反向互补
32 这个序列在pair-end中的的mate序列与参考序列反响互补
64 序列是 mate 1
128 序列是 mate 2
假如说标记为以上列举出的数目,就可以直接推断出匹配的情况。假如说标记不是以上列举出的数字,比如说83=(64+16+2+1),就是这几种情况值和。
3 参考序列的名字(染色体)
4 在参考序列上的位置(染色体上的位置)
5 mapping qulity 越高则位点越独特
bowtie2有时并不能完全确定一个短的序列来自与参考序列的那个位置,特别是对于那些比较简单的序列。但是bowtie2会给出一个值来显示出 这个段序列来自某个位点的概率值,这个值就是mapping qulity。Mapping qulity的计算方法是:Q=-10log10p,Q是一个非负值,p是这个序列不来自这个位点的估计值。
假如说一条序列在某个参考序列上找到了两个位点,但是其中一个位点的Q明显大于另一个位点的Q值,这条序列来源于前一个位点的可能性就比较大。Q值的差距越大,这独特性越高。
Q值的计算方法来自与SAM标准格式,请查看SAM总结。
6 代表比对结果的CIGAR字符串,如37M1D2M1I,这段字符的意思是37个匹配,1个参考序列上的删除,2个匹配,1个参考序列上的插入。M代表的是alignment match(可以是错配)
7 mate 序列所在参考序列的名称
8 mate 序列在参考序列上的位置
9 估计出的片段的长度,当mate 序列位于本序列上游时该值为负值。
10 read的序列
11 ASCII码格式的序列质量
12 可选的区域
AS:i 匹配的得分
XS:i 第二好的匹配的得分
YS:i mate 序列匹配的得分
XN:i 在参考序列上模糊碱基的个数
XM:i 错配的个数
XO:i gap open的个数
XG:i gap 延伸的个数
NM:i 经过编辑的序列
YF:i 说明为什么这个序列被过滤的字符串
YT:Z
MD:Z 代表序列和参考序列错配的字符串
示例:
HWI-ST170:265:5:44:14178:183344#0 145 1 62421 37 63M1I35M 18 56843949 0 CCTGTATACATAGTAATCAAAGTGTACCACTGGTCGGTGTTTGTGTTCAGGCCCCTGTTGGGTAATGTGCATGTGAAGACCTCAGGTGGTATAGTTTTG CEE?@F@BE@GGEGFBHHEDEEEDEEBEDHHBGHGGFHHDFHHHGGGGFFFEEEHFHFGFHHHHHFHHHFHHHHGHGHEHHHHHHHHHFHHHHHHHHHH RG:Z:DU23M01_Duroc XT:A:U NM:i:4 SM:i:37 AM:i:37 X0:i:1 X1:i:0 XM:i:3 XO:i:1 XG:i:1 MD:Z:20T22C1A52
HWI-ST170:264:5:61:3024:21492#0 113 1 62421 37 63M1I29M = 6885283 6822868 CCTGTATACATAGTAATCAAAGTGTACCACTGGTCGGTGTTTGTGTTCAGGCCCCTGTTGGGTAATGTGCATGTGAAGACCTCAGGTGGTATA @:;9AFGCHFHHHEGGGHDCADA?E@EEDAHFHHFFHHHFFHHHHHHHHHFHFHDHHHHHHHHGHGHHGHFHHHHHHHFHHHHHHHHHHHHHH RG:Z:DU23M01_Duroc XT:A:U NM:i:4 SM:i:37 AM:i:37 X0:i:1 X1:i:0 XM:i:3 XO:i:1 XG:i:1 MD:Z:20T22C1A46
FCC1L2FACXX:3:2106:15923:93264 99 1 1073 0 100M = 1461 488 TGTGAAGGCCCCCTGCTCTGACTGTGTTAGTGTCCATTTCTCCTTTTACGGTTGTAGCAGTTGCCTTCTACATTGCGGGGATCCTGTATTGGGTGCATGT ___eceeegfggggdgiiifghii[degfhfgfdffhhhfhfghiiighiiH^`Vbgfffihhiiiihhddbdgfgccca][^bbbbbccbca[X^Y_b_ MD:Z:98A1 PG:Z:MarkDuplicatesRG:Z:SRR949625 NM:i:1 AS:i:98 XS:i:98
FCC1L2FACXX:3:2111:13731:89147 163 1 1073 7 100M = 1438 465 TGTGAAGGCCCCGTGCTCTGACTGTGTTAGTGTCCATTTCTCCTTTTACGGTTGTAGCAGTTGCCTTCTACATTGCGGGGATCCTGTATTGGGTGCATAT bbaeeeeefggggefhiiiihiiicgghhigdehhhiiihiieffhiihihbggdghihfgffhihihf`geed_cecac]accb]_bcccbc^a_bcbb MD:Z:12C87 PG:Z:MarkDuplicatesRG:Z:SRR949625 NM:i:1 AS:i:95 XS:i:95